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2387 人阅读发布时间:2021-11-08 14:05
Hu-PBMC模型是一种将PBMC移植至免疫缺陷小鼠实现免疫系统人源化的小鼠模型。Hu-PBMC相比Hu-HSC以及Hu-BLT具备模型构建周期短、操作简单、节省成本的优点,适用于短期药理药效评估。

上图:三种不同的免疫系统人源化小鼠模型
引自Yin L , Wang X J , Chen D X , et al. Humanized mouse model: a review on preclinical applications for cancer immunotherapy[J]. American Journal of Cancer Research, 2020, 10(12):4568-4584.
Hu-PBMC模型的移植方式主要有腹腔注射与尾静脉注射,通常以4-6周周龄的重度免疫缺陷小鼠作为移植受体,PBMC移植/接种量通常在5~10*10^6/小鼠。根据小鼠品系,移植方式以及PBMC供体差异的不同,局部重组的人源免疫系统程度也不尽相同。
不同免疫缺陷小鼠品系免疫缺陷程度不尽相同,TPCS建议Hu-PBMC模型构建优先选择免疫缺陷程度较高的小鼠,减少GvHD现象,提高建模成功率。

上图:免疫缺陷小鼠品系的发展历程
引自Yin L , Wang X J , Chen D X , et al. Humanized mouse model: a review on preclinical applications for cancer immunotherapy[J]. American Journal of Cancer Research, 2020, 10(12):4568-4584.
PBMC供体差异是另一影响Hu-PBMC模型的重要因素。PBMC系指有圆形细胞核的血细胞,包括淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞。由于人类供体之间存在固有差异性,利用不同供体来源的PBMC构建Hu-PBMC模型,效果也不尽相同。因此TPCS建议使用不同供体来源的PBMC进行预实验,以测试模型构建效果。
针对测试模型构建效果较好的PBMC批次,TPCS可提供10^9级别的PBMC细胞,保障Hu-PBMC的连续性与稳定性,降低不同供体个体差异对Hu-PBMC模型构建的影响。

上图:不同品系小鼠免疫缺陷程度概览
为了进一步协助科研工作者评价PBMC在Hu-PBMC模型构建中的表现,TPCS通过测试精选了适用于Hu-PBMC模型构建的PBMC细胞,提高Hu-PBMC模型构建成功率,助力药物开发与基础科学研究。
TPCS利用不同供体来源的PBMC细胞记录Hu-PBMC模型构建过程中小鼠的绝对体重,实验选取重度免疫缺陷小鼠,对其进行尾静脉注射,注射量为5*10^6个PBMC细胞/只小鼠,定期称量小鼠体重并观察记录,并分别于尾静脉注射后14天、21天以及28天后取小鼠外周血,流式细胞术分析。

上图:Hu-PBMC模型绝对体重变化趋势
小鼠体重可以很好地反应小鼠在尾静脉注射后是否发生移植物抗宿主病(graft versus-host disease, GvHD)以及GvHD的严重程度。从图中可以看出小鼠绝对体重稳定,说明TPCS品牌PBMC在尾静脉注射至重度免疫缺陷小鼠体内后未发生明显排异反应。
为了更直观地反应小鼠体重变化情况,TPCS还统计了相对体重变化情况。

上图:Hu-PBMC模型相对体重变化趋势
从图中可以看出小鼠相对体重稳定变化不超过20%,说明TPCS品牌PBMC在尾静脉注射至重度免疫缺陷小鼠体内后未发生明显排异反应。

上图:Hu-PBMC模型hCD45阳性细胞比例变化趋势
从图中可以看出TPCS品牌PBMC注射至重度免疫缺陷小鼠体内后,人源白细胞比例随时间增加而增加,模型构建效果良好。
