TIL疗法 

1985年Rosenberg教授在利用IL-2 治愈第一个病人后，他迅速意识到IL-2激活了一类免疫细胞。那么第一步就是在“案发现场”寻找武器，自然而然地开始在“肿瘤浸润细胞”中开始了实验。从1986年动物实验证明TIL有效，到1988年发表的第一个TIL临床试验结果，20个入组的melanoma病人中，11个有objective regression! 可以说肿瘤细胞治疗的伟大时代在那一刻开启了。

TIL（Tumor Infiltrating Lymphocytes，肿瘤浸润淋巴细胞）是一种从肿瘤组织中分离出的浸润淋巴细胞。这些淋巴细胞中有部分是针对肿瘤特异性突变抗原的T细胞，是深入到敌军内部打击能力最强的免疫细胞，被认为是一种机体对肿瘤细胞特异性免疫反应。

TIL疗法经过40年的沉淀积累，今年8月Iovance Biotherapeutics宣布向FDA递交了TIL疗法lifileucel的滚动上市申请；10月，Lyell Immunopharma宣布FDA已批准其TIL疗法LYL845的IND申请。TIL细胞药物的未来展现了更多可能性。

 

肿瘤中TIL的扩增通常分两个步骤进行，此过程的细节在不同的实验室之间有所不同，但是总体概念保持不变。

第一步，将肿瘤的小片段置于含有一种或多种刺激T细胞的生长因子的培养基中，最常见的方法是使用白介素2（IL-2）。第一步的长度是灵活的，以允许生成足够的细胞以启动该过程的第二步。

第二步是所谓的快速扩增方案（REP），其中第一步中收获的TIL在过量饲养细胞和T细胞刺激性生长因子的存在下通过触发其T细胞受体（TCR）复合物而诱导大量增殖。第二个扩增步骤通常需要2周左右的时间。REP可使用可溶的抗CD3抗体触发TCR，将辐照的外周血单个核细胞（PBMC）用作饲养细胞，并将IL-2用作T细胞生长因子。

 

妙顺生物TPCS提供经过辐照，且经增殖崩解实验验证的PBMC

为了支持您的TIL快速扩增方案，妙顺生物TPCS提供来自健康捐献者的辐照PBMC服务，异基因外周血单个核细胞（PBMC）用于T细胞共培养。PBMC经γ射线或X射线照射，照射剂量允许保留其固有共刺激能力，但使其无法复制。

 

图1：同批次未辐照PBMC与辐照后PBMC的使用人CD3/CD28激活后细胞数量对比

 

图2：同批次未辐照PBMC与辐照后PBMC的使用人CD3/CD28激活后细胞增殖情况对比

 

PBMC1和PBMC2分别使用X射线，γ射线辐照。使用人CD3/28 T细胞激活剂，在无血清培养基条件下，添加IL-2，培养到17天，观察同批次未辐照PBMC及辐照后PBMC的细胞数量及增殖情况。结果显示，同批次未辐照PBMC细胞增殖倍数达200x，而X射线，γ射线辐照PBMC培养到第14天以后基本上完全崩解。

 

更多辐照PBMC的服务信息

*新鲜细胞及更多规格，详询妙顺生物销售部
 

服务特点 

• 提供项目合规性全套解决方案

• 能够根据研究需求定制样本

• Donor签署的知情同意书

• Donor病毒测试为阴性

• 每个批次的细胞均提供COA

• 可先对Donor进行预筛选，以满足定制规范和传染病筛查

• 完善的Donor回召机制
   

交付标准 

• 外观标准：标签明确，标有服务编码及细胞基本信息；包装应完整，无液体渗漏；

• 微生物标准：仪器培养法无菌检测结果阴性；支原体检测结果阴性；HBV、HCV、HIV、TP、HTLV、B19、EB病毒检测结果阴性；

• 细胞纯度标准：单个核细胞占总细胞比例≥90%；

• 细胞活率标准：双荧光AO/PI仪器计数法检测细胞活率≥90%；

• 细胞数目标准：双荧光AO/PI仪器计数法检测细胞数目≥细胞标签规格；

• 崩解测试：复苏培养 14天，细胞残留率<10%；

• 流式细胞术检测数据。